■ 產(chǎn)品簡介
零背景ZT4-Blunt克隆試劑盒是專門對平滑末端DNA片段或PCR擴增產(chǎn)物進行高效克隆的一種陽性篩選系統(tǒng)。該克隆載體包含一個致死基因，當目的DNA片段插入克隆位點時,該致死基因被破壞，故僅帶插入目的片段的克隆才能生長形成白色菌落，無需加入IPTG及X-Gal進行藍白斑篩選；克隆陽性率超過95%。
■ 產(chǎn)品亮點
·可5min快速連接，且克隆效率超過95%
·無需IPTG及X-Gal進行藍白斑篩選
·PCR擴增產(chǎn)物無需磷酸化
·酶切產(chǎn)物無需去磷酸化
·專用于平滑末端DNA片段或PCR擴增產(chǎn)物
·特別適合Pfu、KOD等系列產(chǎn)物的克隆
1.制備片段
| ★平端片段（Pfu、KOD等擴增產(chǎn)物） |
| ★片段濃度最低可至5ng/μL |
|
2.與載體混合加入連接酶
|
|
|
|
|
★實現(xiàn)5min快連
|
★最長可連接10kb片段（即使5kb片段，也已超過95%的陽性率）
|
| ★載體穩(wěn)定性極高，反復凍融影響極低 |
|
3.轉(zhuǎn)化
|
|
★采用先進的自殺基因篩選技術無需繁瑣藍白斑篩選，陽性克隆率接近100%
|
■ 菌落PCR
■ 儲存
-20℃下至少保存1年。
■ ZT4-Blunt載體測序引物序列
Forward Sequencing Primer，20-mer：5’-TAATACGACTCACTATAGGG-3’
Reverse Sequencing Primer，24-mer：5’-AAGAACATCGATTTTCCATGGCAG-3’
■ ZT4-Blunt載體圖譜
■ ZT4-Blunt載體多克隆位點序列
