DNA片段連接往往用于基因操作過(guò)程。傳統(tǒng)T4 DNA Ligase連接方法連接時(shí)間長(zhǎng)達(dá)16小時(shí)，而且反應(yīng)常常受到DNA末端結(jié)構(gòu)的影響。我公司的Quick DNA Ligation Kit 通過(guò)改造T4 DNA Ligase及其相應(yīng)的緩沖體系，達(dá)到完美的高速高效連接；將反應(yīng)時(shí)間縮短在5-10min，并且不受DNA末端結(jié)構(gòu)的影響。
■ 產(chǎn)品特點(diǎn)
·實(shí)現(xiàn)5min快速連接。
·連接效率高。
·不受DNA末端結(jié)構(gòu)影響，適用廣泛。
建議反應(yīng)體系（10μl反應(yīng)體系）：
名稱
| 加入量
|
Vector
| xμL*1
|
PCR產(chǎn)物或酶切產(chǎn)物
| yμL*2
|
ddH2O
| 補(bǔ)足至7μL
|
5×Quick Ligation Buffer
| 2μL
|
T4 DNA Ligase ( 5 Weiss Units/μL )
| 1μL*3
|
注解：*1：一般載體加入量為10-100ng。
*2：片段與載體摩爾比在3:1~7:1之間，連接效果最好。
*3：T4 DNA Ligase應(yīng)最后加入反應(yīng)體系。
如果使用5ul體系連接，各成分按照比例減半使用，連接效率不變。
加完試劑后，用移液器輕輕吹打混勻或者輕彈管底混勻，低速瞬時(shí)離心收集所有液體在離心管底。
室溫（20℃-30℃）連接5分鐘。
