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莊盟生物

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產(chǎn)品名稱:pUC18質(zhì)粒

貨號 規(guī)格 價格 訂購數(shù)量 是否現(xiàn)貨
ZK110 1μg(20μl,50ng/μl) 580 - + 有貨

基本信息

別名:

pUC-18

啟動子:

Lac/lac promoter

復(fù)制子:

pUC

質(zhì)粒大小:

2686bp

質(zhì)粒標(biāo)簽:

LacZ

原核抗性:

Amp

克隆菌株:

DH5a

培養(yǎng)條件:

37度

5'測序引物:

M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT

3'測序引物:

M13R:CAGGAAACAGCTATGACC


質(zhì)粒屬性

質(zhì)粒宿主:

大腸桿菌

質(zhì)粒用途:

基因模板

片段類型:

cDNA

片段物種:

空載體

原核抗性:

Amp

真核抗性:

熒光標(biāo)記:



質(zhì)粒簡介

pUC18是適合于雙脫氧法DNA測序的載體,通常運用于重組dna的分子克隆中,首先我們制備大腸桿菌的感受態(tài)細(xì)胞(能接受外來重組的dna),這種感受態(tài)菌株必須不同外來DNA分子發(fā)生遺傳重組,通常是rec基因缺陷型的突變體,同時它們必須是限制系統(tǒng)缺陷或限制與修飾系統(tǒng)均缺陷的菌株,即具有這三種缺陷(rk mk rec ),同時對氨芐青霉素敏感(ap)。

puc18載體自身帶有抗氨芐青霉素基因,而外源片段不具有,這樣只有帶有puc18的轉(zhuǎn)化子的菌株才能在氨芐青霉素平板上存活,而外源片段自身環(huán)化的不能存活,這稱為抗性篩選。

pUC18 上帶有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的調(diào)控序列和β-半乳糖苷酶N 端146 個氨基酸的編碼序列,在這個編碼區(qū)中插有一個多克隆位點,且不影響正常功能,DH5α感受態(tài)菌株帶有β-半乳糖苷酶C 端部分序列的編碼信息,當(dāng)puc18載體在正常情況下同感受態(tài)菌株融合后,互補表達有活性的β-半乳糖苷酶,稱為α-互補現(xiàn)象,當(dāng)有外源片段插入多克隆位點后,不能產(chǎn)生互補,即細(xì)菌不能產(chǎn)生β-半乳糖苷酶活性。在呈色底物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-半乳糖苷酶)和誘導(dǎo)物IPTG(異丙基-β-D-硫代半乳糖苷)的存在下,互補產(chǎn)物菌落呈現(xiàn)藍色,不互補產(chǎn)物菌落呈白色,很容易鑒別,這種篩選方法稱為α-互補現(xiàn)象篩選(藍白斑篩選)。由上可見,puc18載體除了能重組導(dǎo)入外源片段外,在篩選表達過程中還具有重要的作用。質(zhì)粒只保證關(guān)鍵序列正確,不保證表達效果。


質(zhì)粒圖譜



質(zhì)粒序列

質(zhì)粒序列可參考(具體以測序為準(zhǔn))下載ZK110 pUC18大腸克隆質(zhì)粒.txt

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