■ 基本信息
別名: | pUC-118 |
復(fù)制子: | pUC |
質(zhì)粒分類(lèi): | 大腸桿菌載體；克隆質(zhì)粒 |
質(zhì)粒大小: | 3162bp |
質(zhì)粒標(biāo)簽: | LacZ |
原核抗性: | Amp |
克隆菌株: | DH5a |
培養(yǎng)條件: | 37度 |
5'測(cè)序引物: | M13R:CAGGAAACAGCTATGACC |
3'測(cè)序引物: | M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT |
備注: | 藍(lán)白斑篩選，產(chǎn)生單鏈DNA |
■ 質(zhì)粒屬性
質(zhì)粒宿主: | 大腸桿菌 |
質(zhì)粒用途: | 基因模板 |
片段類(lèi)型: | cDNA |
片段物種: | 空載體 |
原核抗性: | Amp |
真核抗性: |
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熒光標(biāo)記: |
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■ 質(zhì)粒簡(jiǎn)介
pUC118載體是利用pUC18載體的Nde I 酶切位點(diǎn)，插入含有M13 phage DNA Intergenic region (IG) 的HgiA I (5645) - DraI (5941) 片段構(gòu)建而成的。由于在lacZ基因中含有多克隆位點(diǎn)，因此在含有IPTG、X-Gal 的平板培養(yǎng)基上可以很容易地通過(guò)藍(lán)白篩選判斷載體中有無(wú)DNA片段的插入。同時(shí)還可以通過(guò)載體上的lac promoter表達(dá)外源基因，使用M13系列的通用引物對(duì)插入載體中的DNA片段進(jìn)行測(cè)序。使用Deletion Kit for Kilo-Sequence (Code No. : 6030) 可以對(duì)克隆得到的數(shù)千堿基的DNA片段進(jìn)行測(cè)序。
由于pUC118載體中插入了M13 phage DNA的Intergenic region (IG)，因此pUC118載體還可以在Helper phage M13K07的感染下產(chǎn)生單鏈DNA，包入Phage顆粒內(nèi)后從菌體內(nèi)放出，而不存在Helper phage單鏈DNA的污染。使用本制品時(shí)，可以穩(wěn)定獲得單鏈的長(zhǎng)片段DNA (~7kb)，并且沒(méi)有缺失。質(zhì)粒只保證關(guān)鍵序列正確，不保證表達(dá)效果。
■ 質(zhì)粒圖譜
■ 質(zhì)粒序列
質(zhì)粒序列可參考（具體以測(cè)序?yàn)闇?zhǔn)）下載：
ZK111 pUC118大腸克隆質(zhì)粒.txt
